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澳门太阳集团城网址:蛋白提取操作时应注意的细节点击次数:228 发布时间:2020-07-09

                                           蛋白提取操作时应注意的细节

总体规则:蛋白酶普遍存在,在提取蛋白质的步骤中,早些抑制,经常抑制

分装蛋白溶液,储存于不同的温度和不同的缓冲液中,测蛋白活性,找出适宜储存条件。

冷藏,并加入稳定剂。这些稳定剂一般都能充分保持蛋白的生物学活性。

将蛋白溶液储于50%(V/V)的甘油或悬于硫酸铵(3.2M)中,避免冻存

冰结晶会造成物理剪切及蛋白变性。

避免酶的反复冻融,如果酶需要冻存,分装成小管后冻存。

蛋白质的储存:

蛋白样品在液氮中速冻,拿出后加入10-20%的甘油,长期储存

整个实验过程中,都要将蛋白样品置于冰上

从母管中吸取不同的蛋白时,都要用新鲜的枪头

不要将未用的溶液倒回母管

戴手套操作,避免蛋白交叉污染,或是蛋白酶的污染

避免剧烈的震荡,避免溶液中混入蛋白变性剂

实验的过程中应避免灰尘进入,灰尘包含60%的肌氨酸

操作过程中:

操作时总是小体积小量的操作,避免污染,并且动作要快
 

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